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固相萃取儀應用固相萃取技術時的注意事項

時間:2020-04-18     瀏覽:34

     我們在用固相萃取時,固相萃取儀面臨的一個問題就是:液體應該以什么速率過柱流出,我的經驗是,要想效果好,就要慢,盡量慢。

  對于固相萃取柱中的填料,我們如果局部放大地看,能夠看到其實它們是有很多的空隙,液體流通的渠道很多,如果流得快,相當比例的待測組分還來不及與填料充分作用就地從通道流失;所以要慢,給它們一個充分作用的機會。

  在固相萃取條件選擇上,有人為了提高提取效率,盡量多加液體,或選擇填料量大的小柱,我覺得大可不必如此。尤其在用重力法時,由于效率高,很多情況下是柱頭吸附,并不是所有的填料都在起作用,填料多了不僅液體流出速度會更慢,而且在洗脫時的擴散會很明顯。

  因此建議,夠用就行,在能保證效率時,填料盡量少,加液也不宜多。

  固相萃取從原理上是色譜分離,但是在操作時最好只把它作為吸附萃取劑使用,由于填料性質、松緊常有差異,因此在實際實驗中不必因為追求效果的最佳化而設計出很復雜的洗脫程序。

  在建立條件中,我們應該盡量多利用現成的資料,盡快地建立起體系,同時要對操作過于復雜的步驟保持警惕性,在實驗效果,實驗速率和易操作性三者中取得平衡點。

  固相萃取柱最好只用一次。固相萃取儀因為從嚴格的意義上來說,很多物質的吸附是不可逆的,一次吸附,無法洗脫,影響著下一次吸附,雖然有人做過重復利用的實驗,但是總體來說為了節省一點經費而大大增加了結果的不可靠性和不確定性,是很不合算的行為。

  因此建議,只用一次。如果想節省經費可以從減少填料量和使用小容積管入手,盡量用堆疊接頭和延長管。

  有些人在初次接觸固相萃取時,總覺得它能取代液體萃取,實際上就象毛細管電泳無法取代液相色譜一樣。固相萃取在某些場合比液體萃取合適,但是在更多情況下,還是傳統的液體萃取更可靠更合適。這一點從目前實驗技術的實際發展可以得到印證。

  關于液固萃取,我們不要僅僅把它看作是一個提取過程,從另一個角度來看,它還是一個凈化過程,是把固形干擾物排除凈化的過程。理解這一點,有助于我們優化選擇實驗方法。

  在設計一個實驗時,開始要考慮到其技術上是否先進。而在實際運用中,最終決定這個方法是否可行,是否能夠存在的關鍵是實用性。一個實驗方法不僅要解決問題,而且能夠在人力,物力,財力三方面達到平衡,且滿足可持續、可重復操作的要求。

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