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固相萃取技術及其影響因素

時間:2020-05-30     瀏覽:49

摘要

固相萃取技術由于其溶劑使用量少、操作簡單、選擇性高、重現性好,已發展成為分離和濃縮各種樣品中痕量分析物質的一種強有力的工具。介紹了固相萃取技術的原理,討論了其基本操作過程及影響因素,以更好地了解固相萃取技術

獸藥殘留引發的畜產品安全問題已成為公認的食品安全問題,引起社會的廣泛關注。建立簡便、快速、靈敏的獸藥殘留檢測方法無疑成為檢測和控制獸藥殘留的重要前提。獸藥殘留分析是復雜混合物中痕量組分的分析技術,最顯著的特點是需要嚴格的樣本前處理步驟。在獸藥殘留檢測中60%~80%的工作量和操作成本花在樣品前處理。樣品前處理包括液液萃取、離心、沉淀、蒸餾等傳統技術和固相萃取、凝膠凈化、分子印跡等現代分離技術。傳統方法由于自動化程度低、凈化效率低、選擇性差、成本高、勞動強度大、環境污染嚴重等缺點而逐漸不能滿足獸藥殘留分析的發展要求。

 固相萃取技術由于其溶劑使用量少、操作簡單、選擇性高、重現性好,已發展成為分離和濃縮各種樣品中痕量分析物質的一種強有力的工具。1978年商用固相萃取柱問世以后,固相萃取技術更被廣泛應用于復雜基質的前處理,目前已成為獸藥殘留分析前處理的主流技術。

 1固相萃取技術基本原理 固相萃?。⊿olidPhaseExtraction,SPE)技術基于液相色 譜原理,可近似看作一個簡單的色譜過程。原理是利用固體吸附劑將液體樣品中的目標化合物吸附,與樣品的基體和干擾化合物分離,然后再用洗脫液洗脫或加熱解吸附,達到分離和富集目標化合物的目的[7]。固相萃取可分為在線萃取和離線萃取。前者萃取與色譜分析同步完成,而后者萃取與色譜分析分步完成,兩者在原理上是一致的。

 2基本操作過程

2.1 柱預處理(柱活化) 用適當的溶劑淋洗SPE柱,以使吸附劑保持濕潤,可以 吸附目標化合物或干擾化合物。不同模式固相萃取小柱活化用的溶劑不同,其目的有2個:一是除去填料中可能存在的雜質;二是使填料溶劑化,提高固相萃取的重現性。

2.2上樣 將液態或溶解后的固態樣品倒入預處理后的SPE柱, 然后利用抽真空、加壓或離心的方法使樣品通過SPE柱,在該步驟中,分析物被保留在吸附劑上。

2.3淋洗和洗脫 樣品進入SPE柱、目標化合物被吸附后,視分離模式和 樣品性質而定,可采用適當的洗脫劑將目標化合物直接淋洗下來;也可先將干擾化合物淋洗掉,再用適當的洗脫劑將目標化合物洗脫,通常采用后一種方法更有利于樣品的凈化。淋洗和洗脫同上所述,可采用抽真空、加壓或離心的方法使淋洗液或洗脫液流過吸附劑。

3影響因素

3.1 吸附劑 目前常用的吸附劑有正、反相吸附劑、離子交換吸附劑 和抗體鍵合吸附劑等,試驗時盡量選擇與目標化合物極性相似的吸附劑,其用量大小與目標物性質(極性、揮發性)及其在水樣中的濃度直接相關。

3.2洗脫溶劑 在SPE中,洗脫溶劑的選擇與目標物性質及使用的吸附 劑有關,樓蔓藤等[8]給出了常見有機溶劑的極性和洗脫強度,試驗過程中可根劇被測物的物理、化學性質選用。洗脫劑體積應以淋洗完全為前提,體積最小的為最佳,可通過多次洗脫法(小體積),根據回收率的變化曲線找到最佳的洗脫液體積,顯然,洗脫體積越小富集倍數越高。

3.3保留體積 在加樣過程中,保留體積是SPE技術的關鍵因素之一, 它代表了進行痕量富集時能有效處理的水樣體積。根據色譜分析儀的最小檢出量和水樣中有機物的濃度,可以估算出欲富集的最小水樣體積。另外,樣液的pH值也影響樣品的吸附效率

3.4流速 流速的控制對SPE至關重要,流速過大將引起SPE柱的 穿漏,流速太小則處理速度太慢。柱預處理過程中流速適中,保證溶液充分濕潤吸附劑即可,上樣和洗脫過程則要求流速盡量慢些,以使分析物盡量保留在柱內或達到完全洗脫,否則會導致分析物流失,影響回收率的大小。尤其離子交換過程,進行比較緩慢,應采用較低的流速(0.5~2.0mL/min)。

4結語

固相萃取技術以其既可用于復雜樣品中微量或痕量目 標化合物的提取,又可用于凈化、濃縮或富集的優勢,不僅在獸藥殘留分析領域中擔任重要的角色,而且在農藥殘留中也成為主要的前處理工具。隨著人們對食品安全問題的關注,固相萃取技術不斷得到發展與完善,多樣化、標準化、儀器化和自動化的SPE樣品處理技術越來越成熟,將會更加廣泛地應用于復雜樣品的前處理中,成為目前樣品前處理的主流技術。


 

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