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固相萃取應用步驟說明

時間:2020-05-30     瀏覽:50

1、固相萃取吸附劑與目的化合物之間的反應機理
固相萃取首要經過目的物與吸附劑之間的以下反應力來留樣/吸附的
1)疏水效果力:如C18、C8、Silica、苯基柱等
2)離子交流效果:SAX, SCX,COOH、NH2
3)物理吸附:Florsil、Alumina等


2、pH值對固相萃取的影響
pH值能夠改動方針物/吸附劑的離子化或質子化程度。關于強陽/陰離子交流柱來講,因為吸附劑本身是徹底離子化的狀況,方針物有必要徹底離子化才干夠確保其被吸附劑徹底吸附保存。而方針物的離子化程度則與pH值有關。如關于弱堿性化合物來講,其pH值有必要小于其pKa值兩個單位才干夠確保方針物徹底離子化,而關于弱酸性化合物,其pH值有必要大于其pKa值兩個單位才干確保其徹底離子化。關于弱陰/陽離子交流柱來講,有必要要確保吸附劑徹底離子化才確保方針物的徹底吸附,而溶液的pH值有必要滿意必定的條件才干確保其徹底離子化。
3、固相萃取操作進程及留意事項
對于填料保存機理的不一樣(填料保存方針化合物或保存雜質),操作稍有不一樣。

1)填料保存方針化合物
固相萃取操作一般有四步
Ø 活化----除掉小柱內的雜質并發明必定的溶劑環境。(留意整個進程不要使小柱干枯)
Ø 上樣----將樣品用必定的溶劑溶解,轉移入柱并使組分保存在柱上。(留意流速不要過快,以1ml/min為宜,最大不超越5ml/min)
Ø 淋洗----最大程度除掉攪擾物。(主張此進程完畢后把小柱徹底抽干)
Ø 洗脫----用小體積的溶劑將被測物質洗脫下來并收集。(留意流速不要過快,以1ml/min為宜)

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