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固相萃取技術原理及應用

時間:2020-04-18     瀏覽:57

 
 一、固相萃取基本原理與操作  
1、固相萃取吸附劑與目標化合物之間的作用機理  固相萃取主要通過目標物與吸附劑之間的以下作用力來保留/吸附的
1)疏水作用力:如C18、C8、Silica、苯基柱等
2)離子交換作用:SAX, SCX,COOH、NH2等
3)物理吸附:Florsil、 Alumina等
 2、p H值對固相萃取的影響  pH值可以改變目標物/吸附劑的離子化或質子化程度。對于強陽/陰離子交換柱來講,因為吸附劑本身是完全離子化的狀態,目標物必須完全離子化才可以保證其被吸附劑完全吸附保留。而目標物的離子化程度則與pH值有關。如對于弱堿性化合物來講,其pH值必須小于其pKa值兩個單位才可以保證目標物完全離子化,而對于弱酸性化合物,其pH值必須大于其pKa值兩個單位才能保證其完全離子化。對于弱陰/陽離子交換柱來講,必須要保證吸附劑完全離子化才保證目標物的完全吸附,而溶液的pH值必須滿足一定的條件才能保證其完全離子化。
固相萃取操作步驟及注意事項  針對填料保留機理的不同(填料保留目標化合物或保留雜質),操作稍有不同。
 1)填料保留目標化合物  固相萃取操作一般有四步:
 ?         活化---- 除去小柱內的雜質并創造一定的溶劑環境。(注意整個過程不要使小柱干涸) 
 ?         上樣---- 將樣品用一定的溶劑溶解,轉移入柱并使組分保留在柱上。(注意流速不要過快,以1ml/min為宜,最大不超過5ml/min)
 ?         淋洗---- 最大程度除去干擾物。(建議此過程結束后把小柱完全抽干)
 ?         洗脫---- 用小體積的溶劑將被測物質洗脫下來并收集。(注意流速不要過快,以1ml/min為宜)
2)填料保留雜質    固相萃取操作一般有三步:  
 ?       活化--除去柱子內的雜質并創造一定的溶劑環境。(注意整個過程不要使小柱干涸)  
 ?       上樣--將樣品轉移入柱,此時大部分目標化合物會隨樣品基液流出,雜質被保留在柱上,故此步驟要開始收集(注意流速不要過快)  
 ?       洗脫---用小體積的溶劑將組分淋洗下來并收集,合并收集液。(注意流速不要過快)  此種情況多用于食品或農殘分析中去除色素。

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